Введение
Изменения в коже, особенно лица, связанные со старением, обнаруживаются невооруженным глазом и доставляют людям, в первую очередь женщинам, эстетический и социальный дискомфорт: появляются морщины, кожа становится тонкой, сухой, дряблой, неравномерно пигментированной [1, 2]. С морфологической точки зрения в основе хроностарения кожи лежат процессы атрофии, сопровождающиеся истончением эпидермиса, дезорганизацией внеклеточного матрикса дермы, нарушением структуры, метаболизма, пролиферативного потенциала дермальных фибробластов (ДФ) [1, 2], их синтетической и секреторной активности, функциональной специализации, значительным снижением паракринных и прямых взаимодействий с эпидермальными стволовыми клетками и кератиноцитами [3, 4].
На сегодняшний день существует ряд теорий, объясняющих клеточно-молекулярные механизмы старения вообще и кожи в частности [5]. В 2000 г. группой ученых Италии под руководством C. Franceschi предложена теория «inflammaging», объединившая в названии слова «воспаление» (inflammation) и «старение» (aging) [6], согласно которой, в основе старения лежит хроническое системное стерильное низкоинтенсивное воспаление [6–8]. В inflammaging вовлечены такие механизмы, как клеточное старение, дисфункция митохондрий, нарушения аутофагии, активация инфламмасом, дисрегуляция убиквитин-протеасомной системы, активация путей ответа на повреждение ДНК, изменения состава микробиоты макроорганизма [7]. С возрастом даже у здоровых людей старших возрастных групп повышается сывороточная концентрация провоспалительных цитокинов (ЦК) интерлейкина-6 (ИЛ-6), -1β, фактора некроза опухоли-α (ФНО-α), ИЛ-12, -18 [8]. Inflammaging кожи способствует накопление стареющих ДФ, секретирующих множество медиаторов воспаления, включая ИЛ-8, -6, ФНО-α и CCL2 [9]. При старении в коже снижается число клеток Лангерганса, их миграционная и функциональная активность, что приводит к нарушениям в развитии Т-клеточного иммунного ответа [9].
Нативное происхождение плацентарных препаратов и многокомпонентность их состава, обусловливающие разносторонние клинические эффекты, позволили использовать их в терапии, гинекологии, восстановительной, эстетической и anti-age-медицине [10–15]. Препарат Лаеннек (Japan Bio Products Industry Co., Ltd., Япония) представляет собой гидролизата плаценты человека (ГПЧ), полученный по оригинальной технологии, который производится по GMP-стандарту с использованием многоступенчатого молекулярного фракционирования, что делает возможным внутримышечное, в т.ч. фармакопунктурное и внутривенное, введение препарата [14–16]. В России Лаеннек зарегистрирован в качестве лекарственного препарата для медицинского применения (регистрационный номер – П013851/01, коды по АТХ – A05BA, гепатопротекторное средство, и L03 – иммуномодулирующее средство) [14]. Лаеннек содержит порядка 36 факторов роста клеток, включая IGF-1 (Insulin-like growth factor 1), TGF-β1 (Transforming growth factor beta-1), HGF (Hepatocyte growth factor), EGF (Epidermal growth factor), M-CSF (Macrophage colony-stimulating factor), VEGF (Vascular endothelial growth factor), PDGF (Platelet-derived growth factor)и др., ЦК ИЛ-8, -1α, -1β, -12, ФНО-α и др., витамины В12, В1, В5, В6, С, К, Е, D, ретинол; макро- (N, Р, С, S, Na, Mg, Са, К) и (Zn, Co, Br, Se и др.)-микроэлементы [16, 17].
В составе препарата идентифицированы аминокислотные последовательности ряда пептидов протеома человека, отчасти объясняющие ранозаживляющий, иммуномодулирующий, гепатопротекторный и нейропротекторный эффекты препарата, в частности пептида коллагена Iα2, который через активацию рецепторов DDR регулирует адгезию, рост, миграцию и деление клеток, реконструкцию внеклеточного матрикса соединительной ткани и кожи [17].
Эффективность использования Лаеннека в решении эстетических проблем подтверждена клиническими исследованиями, проведенными на базе сети клиник RHANA с участием 130 пациентов обоего пола в возрасте 33–53 лет [18, 19]. После монотерапии Лаеннеком гидратация кожи возра-стала в среднем на 18,9% у пациентов, получавших Лаеннек в сочетании с профессиональным косметическим уходом и применением косметических средств на основе ГПЧ для ежедневного ухода за кожей на 25,6%. Эластичность и показатели жирности кожи, содержание меланина у пациентов обеих групп изменялись незначительно. Ультразвуковое исследование кожи показало существенное выравнивание рельефа. Улучшались параметры эхогенности кожи, свидетельствующие о стабилизации структур межклеточного матрикса и улучшении микроциркуляции. Эффект омоложения прямо коррелировал с уровнем IGF-1 в крови [18, 19].
В аппаратно-инструментальных исследованиях эффектов применения препаратов Лаеннек и Курасен выявлено улучшение структуры соединительной ткани (увеличение гидратации кожи, количества волокон коллагена и эластина, уплотнение дермы, уменьшение числа и глубины морщин), устранение пятен порфириновой и меланиновой гиперпигментации, что свидетельствует о стимулирующем влиянии на функциональную и синтетическую активность фибробластов и меланоцитов [20].
В нескольких исследованиях изучена эффективность препарата Лаеннек в комплексной коррекции рубцовых поражений кожи [21–23]. Комбинированное применение фракционной лазеротерапии и фармафореза Лаеннека способствовало уменьшению сроков реабилитации, регрессу клинических симптомов, выравниванию рельефа поверхности, улучшению структуры дермы и эпидермиса в зоне рубцового поражения, уменьшению толщины дермы и увеличению акустической плотности тканей при проведении ультрасонографии [23]. Применение Лаеннека совместно с инъекционными процедурами при проведении нитевого лифтинга, лазерного пилинга приводит к улучшению трофики тканей, компенсации явлений интоксикации и лимфостаза, сокращению сроков реабилитации, минимизации риска возникновения воспаления и образования патологических рубцов [16].
Несмотря на разнообразие заболеваний и патологических состояний, при которых отмечена эффективность применения Лаеннека, в большинстве исследований подчеркивается противовоспалительный эффект препарата с цитопротекторной, антиоксидантной и репарационной активностью, что составляет основу антивозрастного, геропротекторного действий Лаеннека [14, 15, 24]. При этом важно, что Лаеннек не оказывает гиперстимулирующего действия на иммунную систему, а напротив, модулирует ее, повышая недостаточную и нормализуя избыточную активность различных звеньев иммунитета в пределах физиологической нормы [14].
Однако в доступной нам литературе отсутствуют данные о применении Лаеннека с целью коррекции инволюционных изменений кожи с последующей оценкой клинической эффективности, показателей системного иммунитета, структурных компонентов и молекулярно-регуляторных факторов кожи.
Цель исследования: комплексная (клинико-инструментальная, иммунологическая, микробиологическая, иммуногистохимическая) оценка эффективности применения препарата ГПЧ для коррекции возраст-ассоциированных модификаций кожи лица.
Методы
В исследование вошли 25 женщин от 39 до 59 лет с признаками возрастных изменений кожи лица. Всем женщинам проведен курс из пяти фармакопунктурных внутримышечных инъекций препарата Лаеннек в проекцию биологически активных точек лица в количестве 2 мл на одну процедуру 1 раз в 5 дней.
Клинико-инструментальная оценка состояния кожи проводилась до и через 45 суток после последней инъекции препарата ГПЧ и заключалась в измерении глубины морщин периорбитальной и периоральной зон, степени деформации овала лица и увлажненности кожи с помощью прибора-дермосканера «SKINCONSULT»Al. Vichy.
Системный иммунитет изучали до курса лечения, на 8-е и 24-е сутки после последней инъекции препарата. В периферической крови определяли число лейкоцитов, моноцитов, нейтрофилов, лимфоцитов. Фагоцитарную функцию нейтрофилов и моноцитов оценивали по методу И.С. Фрейдлин [25], подсчитывая активность фагоцитоза (%), интенсивность фагоцитоза (у.е.), фагоцитарное число (у.е.). Число Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов (CD3+CD4+), цитотоксических Т-лимфоцитов (CD3+CD8+), регуляторных Т-клеток (CD4+CD25+CD127-), В-лимфоцитов (CD19+) подсчитывали с помощью проточного цитофлуориметра фирмы Beckman Coulter (США) с использованием моноклональных антител к CD-маркерам: CD3 Monoclonal Antibody (Clone OKT3), CD19 Monoclonal Antibody (Clone HIB19), eBioscience™ (США); APC Mouse Anti-Human CD4 (Clone RPA-T4), PE-Cy™5 Mouse Anti-Human CD8 (Clone HIT8α), CD25 PE (Clone 2A3), FITC Mouse Anti-Human CD127 (Clone HIL-7R-M21), BD Pharmingen™ (США). Концентрации иммуноглобулина А (IgA), IgM, IgG, ИЛ-4, -6, -8, -10 в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа с помощью наборов реагентов компании «Вектор-Бест» (Россия) на анализаторе «Personal Lab» (Adaltis, Италия).
Для иммуногистохимического исследования (ИГХИ) методом Punch-биопсии под местной анестезией до и через 45 суток после последней инъекции Лаеннека забирали фрагмент кожи правой заушной области диаметром 3 мм, высотой 2 мм, что позволило исследовать эпидермис и дерму. При ИГХИ в дерме изучали содержание коллагенов I и III, ламинина, гиалуронидазы, каспазы 8, фактора роста фибробластов-2 (FGF-2), эпидермального ростового фактора (EGF), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), тромбоцитарного фактора роста (PDGF), инсулиноподобного фактора роста-1 (IGF-1), трансформирующого фактора роста-β (TGF-β), ИЛ-1α, -10, -20, -8, -6, -4, в эпидермисе – филаггрина, ламинина, гиалуронидазы, EGF, IGF-1, TGF-β, ИЛ-1α, -10, используя следующие первичные антитела: Collagen I antibody [COL-I], Collagen III antibody (FH-7A), Laminin antibody (Polyclonal), HYAL1 antibody (Polyclonal), Caspase 8 antibody (Polyclonal), FGF-2 antibody (AS24), EGF antibody (9D7F11), VEGF antibody (Polyclonal), PDGF beta antibody (Polyclonal), IGF-1 antibody (Polyclonal), TGF-β1 antibody (7F6), ИЛ-1a antibody (Polyclonal), ИЛ-10 antibody (Polyclonal), ИЛ-20 antibody (Polyclonal), CXCL8/IL8 antibody (Polyclonal), ИЛ-6 antibody (Polyclonal), GeneTex (США), anti-ИЛ-4 antibody (C1), Abcam (Великобритания). Для иммунного окрашивания применяли пероксидазный метод с полимерной системой детекции (Histofine® Simple Stain MAX PO MULTI, Япония). Конечная оценка проводилась с помощью системы фиксации микроскопических изображений из микроскопа «Сarl Zeiss Axioskop 40», цифровой камеры «Jenoptik ProgRes CT3», персонального компьютера на базе Intel® Core™ i7, программного обеспечения «ProgRes CapturePro 2.5». Количественное исследование осуществляли с помощью программы «Морфология-5.1» (ВидеоТест, Россия). Рассчитывали относительную плотность изучаемых факторов по отношению к общей площади исследуемого кадра, выраженную в объемных процентах (об%).
Бактерицидную активность кожи оценивали по отношению к Escherichia coli методом «агаровых отпечатков» Н.Н. Клемпарской с расчетом индекса бактерицидности в % [26].
Статистическую обработку данных производили с использованием программного пакета «IBM SPSS Statistics 19». Большинство выборок имело неправильное распределение, поэтому были использованы непараметрические методы. Определены Медиана (Ме), Q1; Q3 квартили. Рассчитывали критерии Фридмана и Уилкоксона. Критерий Фридмана служил обобщением для критерия Уилкоксона и определял значимые различия в значении показателей при оценке их в одной и той же группе, но при различных условиях или в динамике.
Результаты
После курса инъекций препарата ГПЧ увеличивалась увлажненность кожи, достигая 57 у.е., по сравнению с исходным уровнем 50 у.е. (р<0,010). Глубина морщин кожи лица при этом значимо снижалась: «гусиных лапок» – с 2,3 до 1,8 у.е. (р<0,010), кисетных морщин – с 1,6 до 1,4 у.е. (р<0,010), морщин в области нижнего века – с 3,5 до 3,0 у.е. (р<0,010); степень деформации овала лица уменьшалась с 2,5 до 2,4 у.е. (р<0,010) (табл. 1).
При оценке клеточного состава периферической крови (табл. 2) после курсовой терапии ГПЧ наиболее значимые изменения обнаружены в показателях процентного и абсолютного содержания моноцитов, которые возрастали к 8-м (р1–2=0,003, р1–2=0,003 соответственно) и далее к 24-м суткам (р1–3=0,000, р1–3=0,013 соответственно) после окончания лечения. При этом активность, интенсивность фагоцитоза и фагоцитарное число моноцитов также статистически значимо увеличивались к 8-м суткам (р1–2=0,011, р1–2=0,008, р1–2=0,009 соответственно) и оставались на высоком уровне до 24-го дня (р1–3=0,008, р1–3=0,008, р1–3=0,011 соответственно). Абсолютное и процентное число нейтрофилов после курсового применения Лаеннека демонстрировало тенденцию к уменьшению на 24-е сутки (р1–3>0,050, р1–3=0,042 соответственно). При этом происходил рост активности фагоцитоза нейтрофилов (р1–3=0,028) при достоверном снижении интенсивности фагоцитоза (р1–3=0,000) с тенденцией к уменьшению фагоцитарного числа (р1–3>0,050) (табл. 2).
После применения препарата ГПЧ прослеживалась тенденция к постепенному повышению абсолютного числа Т-клеток (CD3+) в периферической крови на 8-е и 24-е сутки (р>0,050) (табл. 3). При изучении содержания основных субпопуляций Т-лимфоцитов наибольшие изменения обнаружены в относительном и абсолютном числе регуляторных Т-клеток (T-reg) (CD4+CD25+CD127–), возра-ставшем на 8-е (р>0,050) и особенно значимо на 24-е сутки после терапии (р1–3=0,037, р1–3=0,007 соответственно); в относительном числе Т-хелперов (CD3+CD4+), которое повышалось к 8-м суткам (р1–2=0,017), однако к 24-му дню стремилось к исходному уровню (р1–3>0,050). Число цитотоксических Т-лимфоцитов (CD3+CD8+), наоборот, демонстрировало тенденцию к снижению (р>0,050) (табл. 3).
Анализ гуморального иммунитета (табл. 4) не выявил значимых изменений в числе В-лимфоцитов (CD19+), IgМ и IgG после терапии ГПЧ (р>0,050). Уровень IgА при этом снижался к 8-м суткам (р1–2=0,011) и возрастал к 24-му дню, становясь даже несколько выше исходного уровня (р1–3>0,050). Согласно оценке ЦК периферической крови, установлено, что концентрация ИЛ-4 повышается к 8-м и особенно к 24-м суткам (р1–2>0,050, р1–3=0,006), уровень ИЛ-8 увеличивается к 8-му дню (р1–2>0,050), затем значимо снижается на 24-е сутки относительно исходных значений (р1–3=0,002), количество ИЛ–10 достоверно уменьшается к 8-м суткам (р1–2=0,047), несколько возрастая затем к 24-му дню (р1–3>0,050), уровень ИЛ-6 на 8-е сутки снижается практически в 2 раза (р1–2>0,050), сохраняется на достаточно низком уровне и на 24-й день (р1–3=0,006).
Проводя анализ изменений, происходивших в коже после курса Лаеннека, мы обнаружили статистически значимое увеличение в дерме объемной плотности коллагена I типа на 17,4%, с 25,3 до 29,7 об% (р=0,002), коллагена III типа – на 38,6%, с 27,2 до 37,7 об% (р=0,001) (табл. 5). Содержание гиалуронидазы и каспазы 8 в дерме, филаггрина и гиалуронидазы в эпидермисе практически не менялось (р>0,050).
А вот уровень ламинина в эпидермисе, особенно в дерме, после плацентарной терапии значительно возрастал: в эпидермисе от 11,4 до 14,4 об% (р>0,050), в дерме от 1,97 до 2,85 об% (р1–2=0,000) (табл. 5).
Цитокиновый профиль кожи после курса препарата ГПЧ представлен в табл. 6. Объемная плотность FGF-2 в дерме значимо увеличивалась с исходных 0,47 до 0,53 об% (р=0,005). Также и в эпидермисе, и в дерме наблюдался выраженный рост содержания TGF-β (р=0,000, р=0,019 соответственно).
В эпидермальном компартменте два ключевых ростовых фактора для кератиноцитов IGF-1 и EGF демонстрировали разнонаправленную динамику изменений после лечения Лаеннеком: объемная плотность EGF значимо возрастала с 22,79 до 25,2 об% (р=0,016), а IGF-1 уменьшалась с 3,96 до 3,78 об% (р=0,022). Уровни ангиогенных и митогенных факторов VEGF и PDGF в дерме после курсового воздействия препарата ГПЧ также менялись в разных направлениях: VEGF увеличивался с 1,18 до 1,91 об% (р=0,023), а PDGF снижался с 1,04 до 0,74 об% (р=0,002) (табл. 6).
Содержание ИЛ-1α в эпидермисе после терапии ГПЧ практически не менялось (р>0,050), при этом достоверно возрастая в дерме с 2,8 до 3,59 об% (р=0,001). Также в дерме значимо увеличивалась объемная плотность: ИЛ-6 с 0,45 до 0,53 об% (р=0,001), ИЛ-20 с 0,8 до 1,44 об% (р=0,002). Уровень же дермального ИЛ-8 достоверно снижался до 0,68 об% по сравнению с исходным 0,81 об% (р=0,014). Изменения ИЛ-4 и-10 после курса Лаеннека не были статистически значимы (р>0,050) (табл. 6).
Согласно оценке бактерицидной активности кожи, которая в известной степени служит отражением состояния факторов врожденного иммунитета кожи, антимикробных пептидов, молочной и жирных кислот, мы выявили достоверное повышение индекса бактерицидности после курса инъекций Лаеннека: до 94% относительно исходных 88% (р=0,035).
Обсуждение
Полученные нами данные свидетельствуют: курс инъекций Лаеннека приводит к значимой коррекции возрастных изменений кожи лица, уменьшая выраженность морщин и усиливая гидратацию кожи, что соотносится с данными других авторов [18–20, 27–29]. К основным структурным белкам кожи, определяющим ее плотность и прочность, относятся коллагены, из которых в дерме взрослого человека преобладают фибриллярные коллагены I и III типов [30, 31]. Однако с возрастом количество коллагена, производимого ДФ, снижается, а деградация его усиливается, что служит одним из факторов инволюционных изменений кожи, повышения ее дряблости и потери эластичности [31, 32]. Наши исследования показывают, что Лаеннек приводит к значимому росту объемной плотности коллагенов I и III в коже, тем самым способствуя восстановлению ее биомеханических свойств.
Старение кожи также сопровождается изменением свойств базальной мембраны эпидермиса и дермо-эпидермального соединения, что приводит к сглаживанию и уменьшению площади контакта между эпидермисом и дермой, хрупкости кожи, нарушению реакций клеток на механические факторы, дисбалансу обмена питательными веществами и кислородом между этими компартментами [30, 33]. Одним из инициаторов сборки базальной мембраны считается ламинин [33], вырабатываемый кератиноцитами и ДФ [32], выполняющий стабилизирующую роль и являющийся адгезивным субстратом для эпителиоцитов [34]. По нашим данным, препарат ГПЧ способствовал повышению содержания ламинина в коже, таким образом оказывая положительное влияние на ее структуру, усиливая дермо-эпидермальное соединение, улучшая плотность контакта клеток эпидермиса, трофику базальных кератиноцитов. Кроме того, наблюдаемое нами после курса Лаеннека увеличение содержания в эпидермисе EGF, который через рецепторы EGFR, экспрессируемые базальными кератиноцитами, регулирует пролиферацию и дифференцировку последних [35], также, вероятно, способствует обновлению клеток эпидермального компартмента.
Повышение уровня коллагенов I и III и ламинина, источником которых являются ДФ, служит косвенным свидетельством влияния Лаеннека на эти клетки. Ранее было показано, Лаеннек оказывает воздействие на фибробласты человека, снижая число стареющих клеток при культивировании in vitro [29]. Регуляция работы ДФ in vivo осуществляется посредством ряда ЦК, эндогенных полипептидных медиаторов межклеточного взаимодействия, к которым относятся интерлейкины, интерфероны, хемокины, факторы роста и дифференцировки [36]. Важнейшим свойством ЦК остается плейотропность биологического действия. При этом ЦК в основном служат коротко-дистантными медиаторами, хотя некоторые проявляют и системную активность [36]. Факторы роста на сегодняшний день стали важным терапевтическим средством, позволяющим избегать старения, т.к. они отвечают за дифференцировку и созревание клеток, что напрямую коррелирует с минимизацией местных эстетических изменений, возникающих с возрастом [37].
По нашим данным, после курса инъекций ГПЧ в дерме достоверно увеличивалась объемная плотность FGF-2, TGF-β, VEGF, ИЛ-1α, -6, -20 с одновременным снижением PDGF и ИЛ-8. FGF-2 уменьшает и предотвращает образование морщин, активируя клетки кожи, стимулируя пролиферацию ДФ и кератиноцитов, играет важную роль в модуляции процессов ангиогенеза и репарации тканей, обладает антивозрастным действием [37, 38]. TGF-β является ключевым ЦК, который активирует экспрессию генов и биосинтез коллагенов в ДФ, ингибирует его деградацию, обеспечивая гомеостаз коллагена [30, 39]. Для процессов обновления и восстановления кожи необходимо адекватное кровоснабжение. Главным механизмом регуляции процессов ангиогенеза является высвобождение факторов, влияющих на эндотелиоциты. Одним из ключевых ЦК при этом остается VEGF, потенциальный митоген для клеток кровеносных и лимфатических сосудов [40], который также обладает синергичным с TGF-β действием [41].
Выявленное нами повышение уровня ИЛ-6 в дерме после инъекций препарата ГПЧ можно рассматривать как еще один возможный «инструмент» для обновления эпидермиса и коррекции его возраст-ассоциированных изменений, т.к. этот ЦК, выделяясь из ДФ, играет ключевую роль в пролиферации и дифференцировки кератиноцитов [42]. Кроме того, ИЛ-6 регулирует поляризацию макрофагов в сторону клеток М2 субтипа, которые продуцируют TGF-β [43], индуцируют выработку коллагена I [39, 44] и экспрессию генов TGF-β [39] в ДФ. TGF-β в свою очередь способствует продукции фибробластами ИЛ-6 [44]. В ответ на ИЛ-6 фибробласты, кератиноциты и макрофаги экспрессируют VEGF [43].
Помимо влияния на фибробласты TGF-β обладает иммуносупрессорной активностью, являясь одним из ключевых ЦК Т-reg, и служит элементом обратной регуляции воспалительной реакции [45]. У обследованных нами женщин после курсового введения Лаеннека наблюдалось увеличение количества T-reg с одновременным ростом уровня ИЛ-4 и снижением концентрации ИЛ-6 и-8, параллельно повышалось число моноцитов со значимым усилением активности и интенсивности фагоцитоза. С одной стороны, повышение фагоцитарной активности моноцитов in vitro может косвенно свидетельствовать об усилении их фагоцитарных возможностей in vivo в отношении, в частности апоптотических телец и другого эндогенного «мусора», накапливающегося при старении, за счет скавенджер-рецепторов на их мембране [46]. С другой стороны, моноциты крови, мигрируя в ткани, превращаются в макрофаги (МФ), которые под действием микроокружения способны дифференцироваться в различные функциональные типы: классически активированные провоспалительные М1-МФ и альтернативно активированные противовоспалительные М2-МФ [46]. При этом T-reg за счет своих ЦК (ИЛ-4, ИЛ-13, ИЛ-10) и контактных взаимодействий способны направлять дифференцировку МФ в сторону именно клеток М2 фенотипа со сниженной продукцией провоспалительных ЦК/хемокинов (ИЛ-1, -6, ФНО-α, ИЛ-8) и повышенными фагоцитарными возможностями, направленными в т.ч. на поглощение и утилизацию апоптозных клеток [46, 47]. В рамках inflammaging подобные процессы можно рассматривать как важный механизм уменьшения выраженности системного воспаления, обусловленного хронической активацией в первую очередь клеток врожденного иммунитета. Кроме того, М2-МФ способствуют пролиферации ДФ и образованию ими коллагена I [48], в частности, за счет продукции TGF-β [43], что в контексте возраст-ассоциированных изменений кожи может иметь большое значение для восстановления коллагенового каркаса дермы.
Однако М2-МФ, а также дисрегуляция и устойчивая TGF-β-опосредованная активация клеток могут играть существенную роль в инициации и поддержании фиброгенеза, включающего усиленную инфильтрацию и/или пролиферацию фибробластов, образование миофибробластов и повышение синтеза компонентов внеклеточного матрикса [48, 49]. Поэтому наряду с ростом TGF-β повышение уровня в дерме FGF-2 и ИЛ-1α, обладающих антифибротическим действием [30, 41], и одновременное снижение PDGF, проявляющего прямую и синергичную с TGF-β профибротическую активность [30, 39, 41], вероятно, можно рассматривать как компенсаторно-регуляторный механизм, параллельно запускаемый Лаеннеком и способствующий поддержанию кожного гомеостаза.
Выводы
Курс инъекций Лаеннека приводит к уменьшению глубины морщин параорбитальной и периоральной областей, деформации овала лица, повышает увлажненность кожи.
При ИГХИ кожи после курсового применения Лаеннека выявляется увеличение в дерме объемной плотности таких структурных компонентов, как коллагены I и III и ламинин. При оценке цитокинового спектра в дермальном компартменте наблюдается повышение содержания FGF-2, TGF-β, VEGF, ИЛ-1α, -6, -20 с одновременным снижением PDGF и ИЛ-8, в эпидермисе возрастает TGF β и EGF при уменьшении IGF-1.
При микробиологическом исследовании кожи методом «агаровых отпечатков» после применения Лаеннека выявляется повышение бактерицидной активности кожи.
При оценке клеточных факторов системного иммунитета после курса инъекций Лаеннека наиболее выраженные изменения в сторону увеличения наблюдаются в числе T-reg и моноцитов с одновременной активацией показателей фагоцитоза последних. При изучении гуморальных факторов периферической крови отмечается снижение уровней провоспалительных ИЛ-6 и -8 с одновременным повышением ИЛ-4.
